حیوانات
آزمایش ها مطابق با راهنمای مؤسسه ملی بهداشت برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی انجام شد. پروتکل ها توسط کمیته اخلاق حیوانات محلی (کمیته چارلز داروین شماره 5، شماره ثبت 9529 و 26889) تصویب شد و مطابق با دستورالعمل 2010/63/EU پارلمان اروپا انجام شد. موشهای نر لانگ-ایوانز بین 2 تا 12 ماه و موشهای نر WT (C57BL/6J) با سن 9 هفته از آزمایشگاههای Janvier به دست آمدند. موش های صحرایی تراریخته نر P23H (خط 1) (9 تا 22 ماه) به صورت محلی پرورش داده شدند.
شبیه سازی پلاسمید و تولید AAV
پلاسمیدهای حاوی E. coli mscL توالی در فرم WT و با جهش G22S از فرانچسکو دیفاتو (پلاسمیدهای Addgene #107454 و #107455) به دست آمد.28. برای هدف قرار دادن RGCها، پروموتر SNCG31 در یک پلاسمید ستون فقرات AAV حاوی mscL توالی با ژن tdTomato و سیگنال صادرات Kir2.1 ER ترکیب شد تا بیان را در غشای پلاسمایی هدایت کند. برای زایمان داخل زجاجیه از وکتور AAV2.7m8 استفاده شد. برای هدف قرار دادن نورون ها در لایه های قشر V1، پروموتر SNCG با پروموتر CamKII جایگزین شد و یک وکتور AAV9.7m8 انتخاب شد. AAVهای نوترکیب با روش همتراسفکشن پلاسمیدی تولید شدند و لیزهای حاصل با خالص سازی یدیکسانول خالص شدند.31.
محرک آمریکا
سه مبدل متمرکز ایالات متحده با فرکانس های مرکزی مختلف استفاده شد: 0.50 مگاهرتز (قطر، Ø = 1.00 اینچ = 25.4 میلی متر؛ فاصله کانونی، f = 1.25 اینچ = 31.7 میلی متر) (V301-SU، Olympus)، 2.25 مگاهرتز (Ø = 0.50 اینچ = 12.7 میلی متر، f = 1.00 اینچ = 25.4 میلی متر) (V306-SU، Olympus) و 15.00 مگاهرتز (Ø = 0.50 اینچ = 12.7 میلی متر، f = 1.00 اینچ = 25.4 میلی متر) (V319-SU، Olympus)، مربوط به دیافراگم های عددی F/Ø = 1.25 و 2.00. میدان های صوتی تابش شده توسط آن سه مبدل متمرکز در شکل XNUMX ارائه شده است. 1 (شبیه سازی) و داده های توسعه یافته شکل. 3 (اندازه گیری های تجربی). برای تولید شکل موج محرک از یک Handyscope TiePie (HS5, TiePie Engineering) استفاده شد که سپس از طریق یک تقویت کننده توان RF 80 دسی بل (VBA 230-80، Vectawave) متصل به مبدل عبور داده شد. خروجی فشار مبدل (فشار در فوکوس، نقشه های فشار سه بعدی (3 بعدی)) در یک مخزن آب گاز زدایی شده با تداخل سنج هتروداین Royer-Dieulesaint اندازه گیری شد.47. محرک های ایالات متحده که برای تحریک خارج از بدن و in vivo استفاده می شوند دارای ویژگی های زیر بودند: فرکانس تکرار پالس 1 کیلوهرتز با چرخه کاری 50٪، مدت زمان فراصوت بین 10 تا 200 میلی ثانیه و فاصله بین محرک بین 0.01 و 2.00 ثانیه. اوج فشار آکوستیک به ترتیب از 0.11 تا 0.88 MPa، 0.30 تا 1.60 MPa و 0.20 تا 1.27 MPa برای مبدل های 0.50، 2.25 و 15.00 مگاهرتز بود. مقادیر میانگین شدت پالس فضایی تخمینی مربوطه (Isppa) 0.39-25.14، 2.92-83.12 و 1.30-52.37 وات سانتی متر بود.-2.
انتقال ژن داخل زجاجیه و تصویربرداری شبکیه
موش ها بیهوش شدند48 و سوسپانسیون AAV (2 میکرولیتر)، حاوی بین 8 تا 14 × 1010 ذرات ویروسی به مرکز حفره زجاجیه تزریق شد. یک ماه بعد، تصویربرداری فلورسانس tdTomato روی چشم های تزریق شده با میکروسکوپ تصویربرداری شبکیه MICRON IV (آزمایشگاه های تحقیقاتی Phoenix) و Micron Discover v.2.2 انجام شد.
ضبط های MEA
قطعات شبکیه بر روی یک غشای فیلتر (Whatman، GE Healthcare Life Sciences) مسطح شدند و روی MEA (قطر الکترود، 30 میکرومتر؛ فاصله، 200 میکرومتر؛ MEA256 200/30 iR-ITO، سیستمهای چند کاناله) پوشیده شده با پلی-Channel قرار گرفتند.l-لیزین (0.1٪، سیگما)، با RGCها رو به الکترودها31. آنتاگونیست گیرنده گلوتامات AMPA/کائینات 6-سیانو-7-نیتروکینوکسالین-2,3،25-دیون (CNQX، 3 میکرومولار، سیگما-آلدریچ)، آنتاگونیست گیرنده گلوتامات NMDA [3H]2-(4-کربوکسی پی پرازین-1-ایل) پروپیل -10-فسفونیک اسید (CPP، XNUMX میکرومولار، سیگما آلدریچ) و یک آگونیست انتخابی گیرنده متابوتروپیک گلوتامات گروه III، l-(+)-2-آمینو-4-فسفونوبوتیریک اسید (LAP4، 50 میکرومولار، Tocris Bioscience)، حمام از طریق خط پرفیوژن اعمال شد. محرک های نور با یک نمایشگر میکروآینه دیجیتال (Vialux؛ وضوح، 1,024 × 768) همراه با یک منبع نور دیود ساطع کننده نور سفید (MNWHL4، Thorlabs) متمرکز بر صفحه گیرنده نور (تابش، 1 میکرووات سانتی متر) تحویل داده شدند.-2). مبدل های ایالات متحده با یک مخروط جفت سفارشی پر از آب گاز زدایی شده و روی یک صفحه موتوری (PT3/M-Z8، Thorlabs) که به صورت متعامد بالای شبکیه قرار داده شده است، جفت شدند. سیگنال منعکس شده تراشه MEA و شبکیه با یک دستگاه کلید ایالات متحده (Lecoeur Electronique) شناسایی شد. فاصله بین شبکیه و مبدل برابر با فاصله کانونی مبدل بود. این با زمان پرواز سیگنال منعکس شده تأیید شد. از ضبطهای RGC با پیش تقویتکننده 252 کانالی و MC_Rack نسخه 4.6.2 (سیستمهای چند کانالی)، اسپایکها با نرمافزار Spyking CIRCUS 0.5 مرتب شدند.49. پاسخهای RGC با اسکریپتهای سفارشی نوشته شده در MATLAB (MathWorks 2018b) برای طبقهبندی بهعنوان ON، ON-OFF یا OFF، با شاخص غالب پاسخ، تجزیه و تحلیل شدند.50. تأخیر به عنوان زمان بین شروع محرک و حداکثر مشتق تابع چگالی سنبله (SDF) محاسبه شد. دو دسته از سلولهای پاسخدهنده ایالات متحده بر اساس تأخیر شناسایی شدند - SL و LL - با تعیین آستانهای برابر با حداقل توزیع تأخیر پاسخهای سلولهای NT به US (45 میلیثانیه). مقدار اوج را تعیین کردیم A از SDF برای محاسبه مدت زمان پاسخ، که به عنوان فاصله زمانی بین دو نقطه زمانی که SDF برابر بود با A/e (جایی که A دپلاریزاسیون اوج است و e شماره اویلر است). عامل فانو، کمیت متغیر تعداد سنبله، به عنوان نسبت واریانس تعداد سنبله به میانگین محاسبه شد. فاصله اقلیدسی بین دو سلول فعال شده با توجه به حداکثر سرعت شلیک سلول ها وزن شد. نسبت تعداد سلول های فعال شده به اندازه ناحیه تحریک شده بر روی تراشه MEA با در نظر گرفتن اندازه نقطه کانونی ایالات متحده برای 2.25 و 15.00 مگاهرتز و اندازه MEA برای 0.50 مگاهرتز محاسبه شد، زیرا نقطه کانونی بزرگتر بود. از MEA برای این فرکانس. مرکز پاسخ با وزن دادن به حداکثر سرعت شلیک هر سلول با فاصله آن از سایر سلولهای پاسخدهنده تخمین زده شد و جابجایی پاسخ به عنوان فاصله اقلیدسی بین دو موقعیت مرکز پاسخ محاسبه شد.
تزریق داخل جمجمه
سوسپانسیون های AAV در دو مکان مختلف در نیمکره راست موش ها (2.6 میلی متر ML، 6.8 میلی متر AP و 3.1 میلی متر ML، 7.2 میلی متر AP از برگما) یا در یک مکان در موش (2.5 میلی متر ML، 3.5 میلی متر AP از AP) تزریق شد. برگما)48. برای تزریق موش، سوسپانسیون (200 nl حاوی 0.2-8.0 × 1015 ذرات ویروسی) در سه عمق مختلف (1,100، 1,350 و 1,500 میکرومتر از سطح قشر مغز) با کنترلکننده پمپ میکروسرنگ (Micro4، World Precision Instruments) با سرعت 50 نانو لیتر در دقیقه تزریق شد.-1 و سرنگ 10 میکرولیتری همیلتون. در موش، سوسپانسیون AAV (1 میکرولیتر حاوی 0.2-8.0 × 1015 ذرات ویروسی) در فاصله 400 میکرومتری از سطح قشر مغز با سرعت 100 نانو لیتر در دقیقه تزریق شد.-1.
ضبط خارج سلولی در داخل بدن
یک ماه پس از تزریق AAV، یک کرانیوتومی کوچک (5 × 5 میلی متر).2) بالای V1 در نیمکره راست انجام شد48. فلورسانس tdTomato با میکروسکوپ تصویربرداری شبکیه MICRON IV و Micron Discover نسخه 2.2 (آزمایشگاههای تحقیقاتی Phoenix) بررسی شد. یک آرایه الکترود μEcog 32 سایتی (قطر الکترود، 30 میکرومتر؛ فاصله الکترود، 300 میکرومتر؛ FlexMEA36، سیستمهای چند کاناله) روی ناحیه ترانسفکت شده یا در ناحیه مشابهی برای موشهای کنترل قرار داده شد. ضبطهای MEA با یک میکروپروب سیلیکونی 16 نقطهای که در 45 درجه به سمت سطح مغز کج شده بود (قطر الکترود، 30 میکرومتر؛ فاصله، 50 میکرومتر؛ A1x16-5mm-50-703، NeuroNexus Technologies) و MC_Rack v. 4.6.2 انجام شد. MEA با یک میکرومانیپولاتور سه محوره (Sutter Instruments) 1,100 میکرومتر به داخل قشر پیش رفت. مبدل های ایالات متحده با یک مخروط جفت سفارشی پر از آب گاز زدایی شده و ژل ایالات متحده در یک صحنه موتوری به مغز جفت شدند. فاصله بین قشر و مبدل برابر با فاصله کانونی مبدل بود. محرکهای بینایی توسط یک دیود ساطع کننده نور با نور سفید (MNWHL4، Thorlabs) که در فاصله 15 سانتیمتری از چشم (4.5 میلیوات سانتیمتر) قرار داده شده بود، ایجاد شد.-2 در قرنیه). ضبط ها با تقویت کننده های 32 کانالی و 16 کانالی (مدل ME32/16-FAI-μPA، سیستم های چند کاناله) دیجیتالی شدند. ضبطهای μEcog با اسکریپتهای MATLAB سفارشی و ضبطهای MEA با نرمافزار Spyking CIRCUS و اسکریپتهای MATLAB توسعهیافته مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. مدت زمان پاسخ به عنوان فاصله بین دو نقطه زمانی که در آن پتانسیل برانگیخته قشر مغز برابر بود با A/e. منطقه فعال شده به عنوان منطقه ای از نقشه فعال سازی شبه رنگ تعریف شد که دپلاریزاسیون اوج بیش از سطح نویز پس زمینه محاسبه شده به عنوان 2 × sd سیگنال بود. مرکز پاسخ با وزن دهی پیک دپلاریزاسیون هر الکترود با فاصله آن از الکترودهای دیگر برآورد شد. جابجایی نسبی آن هنگام حرکت مبدل ایالات متحده به عنوان فاصله اقلیدسی دو موقعیت محاسبه شد. برای ضبط های داخل قشری، زمان تاخیر سلولی به عنوان زمان بین شروع محرک و حداکثر مشتق SDF برآورد شد.
جراحی برای تست رفتاری in vivo
موش های C57BL6J به صورت زیر جلدی بوپرنورفین (0.05 میلی گرم در کیلوگرم) تزریق شدند.-1(Buprécare، Axience) و دگزامتازون (0.7 میلی گرم در کیلوگرم).-1) (دگزازون، ویرباک). حیوانات با ایزوفلوران (5% القاء و 2% نگهداری، در مخلوط هوا/اکسیژن) بیهوش شدند و سر تراشیده شد و با محلول ضد عفونی کننده تمیز شد. سر حیوانات روی یک قاب استریوتاکتیک با سیستم تحویل ایزوفلوران و پماد چشمی ثابت شد و یک بافت سیاه روی چشم ها اعمال شد. دمای بدن در 37 درجه سانتیگراد حفظ شد. پس از تزریق موضعی لیدوکائین (4 میلی گرم در کیلوگرم).-1) (Laocaïne, Centravet) برش بر روی پوست ایجاد شد. دو پیچ در جمجمه، پس از یک کرانیوتومی کوچک (تقریباً 5.0 × 5.0 میلی متر) ثابت شد.2) بالای V1 در نیمکره راست (مته فولادی 0.5 میلی متر) انجام شد و یک بافر قشر اعمال شد. کورتکس با یک ورق پلاستیکی TPX (ضخامت 125 میکرومتر) پوشانده شد و با سیمان اکریلیک دندانی (Tetric Evoflow) مهر و موم شد. برای آزمایشات رفتاری، یک هدبار فلزی (PhenoSys) برای تثبیت سر، سپس با سیمان دندانی (FujiCEM 2) به جمجمه در نیمکره چپ چسبانده شد. حیوانات با تزریق زیر جلدی سرم فیزیولوژیکی و پماد روی چشم (Ophtalon، Centravet) در یک اتاق ریکاوری قرار داده شدند. بوپرنورفین در طی مانیتورینگ پس از جراحی تزریق شد.
تست های رفتاری موش
موش ها تا زمانی که به حدود 80 تا 85 درصد وزن خود رسیدند، در یک برنامه محدودیت آب قرار گرفتند. پیروی از عادت به شرایط آزمون36موش ها برای پاسخ به LS با انجام یک کار تشخیص داوطلبانه آموزش دیدند: لیسیدن یک فواره آب (سوزن گیج 18، تقریباً 5 میلی متر از دهان) در پاسخ به تحریک میدان کامل نور سفید (طول 200 و 50 میلی ثانیه) چشم چپ (گشاد شده با تروپیکامید، Mydriaticum Dispersa) بیش از 35 کارآزمایی در هر مدت تحریک و بنابراین 70 کارآزمایی در روز. آب (~4 میکرولیتر) به طور خودکار 500 میلی ثانیه پس از روشن شدن چراغ، از طریق یک سیستم آب کالیبره شده توزیع شد. پروتکل رفتاری و تشخیص لیس توسط یک سیستم سفارشی کنترل می شد36. چهار روز بعد (دو روز استراحت در آخر هفته)، تحریکات ایالات متحده در V1 به مدت 50 میلی ثانیه در سه مقدار فشار مختلف (0.2، 0.7 و 1.2 مگاپاسکال) تحویل داده شد. این مقادیر فشار هر روز به ترتیب متفاوتی تحویل داده شد (هر بار 35 آزمایش). فواصل بین آزمایشی به طور تصادفی متفاوت بود و بین 10 تا 30 ثانیه متغیر بود. مبدل US 15 مگاهرتز با یک مخروط جفت سفارشی ساخته شده پر از آب و ژل US به مغز جفت شد. میزان موفقیت با شمارش تعداد آزمایشهایی که در آنها موشها لیسهای پیشبینیکننده (بین شروع محرک و باز شدن دریچه آب) انجام دادند، محاسبه شد. نرخ لیس پیش بینی شده (شکل. 6e) برای جلسه با تفریق از نرخ لیس پیش بینی یک آزمایش، نرخ لیس خود به خودی (محاسبه شده در تمام پنجره های زمانی 1 ثانیه قبل از شروع هر محرک منفرد) محاسبه شد (شکل XNUMX). 6a) برای همه آزمایشات) و ضرب در میزان موفقیت. تأخیر لیس با تعیین زمان اولین لیس پیش بینی پس از شروع محرک محاسبه شد. موشهایی که برای آنالیز نگهداری شدند، در روز چهارم پس از LS، میزان موفقیت بالاتر یا برابر با 60 درصد را نشان دادند. سپس، جلسات سبک یا ایالات متحده که یک رفتار لیسیدن اجباری را نشان میدهند، بر اساس شناسایی دور از دسترس که با استفاده از روش ROUT انجام شده است، حذف شدند.Q = 1٪ بر روی نرخ لیس خود به خودی جلسه با میانگین اندازه گیری ها در تمام آزمایش های جلسه در پنجره زمانی 1 ثانیه قبل از شروع محرک کارآزمایی.
ایمونوهیستوشیمی و تصویربرداری کانفوکال
نمونه ها یک شبه در دمای 4 درجه سانتی گراد با آنتی بادی مونوکلونال ضد RBPMS (1:500، خرگوش؛ ABN1362، Merck Millipore) برای شبکیه انکوبه شدند.31با یک آنتی بادی ضد NeuN مونوکلونال (1:500، موش، کلون A60؛ MAB377، Merck Millipore) برای بخش های مغز48. بخشها سپس با آنتیبادیهای ثانویه کونژوگه با Alexa Fluor 488 (1:500، ضد موش الاغ و ضد خرگوش خر IgG 488، پلی کلونال؛ A-21202 و A-21206، Invitrogen، به ترتیب) و DAPI (1:1,000،9542) انکوبه شدند. ؛ D1، Merck Millipore) به مدت 1000 ساعت در دمای اتاق. یک میکروسکوپ کانفوکال Olympus FV20 با شیئی × 20 (UPLSAPO 0.85XO با دیافراگم عددی 10) برای به دست آوردن تصاویر شبکیه های تخت و مقاطع مغزی (نرم افزار FV4.2-ASW v. XNUMX) استفاده شد.
در تصاویر هم کانونی پردازش شده با فیجی (ImageJ v. 1.53q)، سلولهای مثبت RBPMS و NeuN بهطور خودکار با پلاگین «تجزیه و تحلیل ذرات» شمارش شدند. سلولها بهصورت دستی توسط دو کاربر مختلف با افزونه «شمارنده سلول» شمارش شدند. کمی سازی با به دست آوردن پشته های کانفوکال در حداقل چهار ناحیه ترانسفکت شده تصادفی 0.4 میلی متری انجام شد.2 (شکل داده های پیشرفته 1). برای نورون های V1، برش مغز ساژیتال با بزرگترین ناحیه فلورسانس tdTomato برای هر حیوان انتخاب شد. منطقه مورد علاقه به صورت دستی در V1 تعریف شد و کمی سازی ها در حداقل شش منطقه 0.4 میلی متری به طور تصادفی انتخاب شده انجام شد.2.
شبیه سازی های گرمایش بافت توسط ایالات متحده
یک فرآیند سه برابری برای تخمین اثرات حرارتی استفاده شد: (1) شبیهسازی میدانهای صوتی تولید شده توسط سه مبدل، با پارامترهای آکوستیک واقعی. (2) تأیید اینکه آکوستیک غیرخطی نقش مهمی در انتقال حرارت ندارد. و (3) شبیهسازی واقعی انتقال حرارت و افزایش دما ناشی از تمرکز ایالات متحده در یک رژیم خطی برای پارامترهای مورد استفاده در این مطالعه.
برای شبیهسازی غیرخطی، از جعبه ابزار k-Wave متلب با تعریف هندسه مبدل به صورت سه بعدی و با استفاده از پارامترهای زیر برای محیط انتشار (آب) استفاده کردیم: سرعت صدا، c = 1,500 متر بر ثانیه-1; جرم حجمی، ρ = 1,000 کیلوگرم متر-3; ضریب غیر خطی، B/A = 5; ضریب تضعیف، α = 2.2 10-3 دسی بل سانتی متر-1 مگاهرتز-y; قانون توان فرکانس ضریب تضعیف، y = 2 (مراجعه 51). ما میدانهای موج سه بعدی شبه تک رنگ را با استفاده از انفجارهای طولانی 3 سیکل شبیهسازی کردیم. این ماکزیمم میدان فشار را در سه بعد و همچنین شکل موج در کانون را به ما داد. شبیه سازی ها با تنظیم فشار ورودی (تحریک مبدل شبیه سازی شده) برای رسیدن به فشار در کانون اندازه گیری شده در مخزن آب با مبدل های واقعی کالیبره شدند. عرض کامل در نیمه حداکثر (FWHM) قطر نقطه کانونی در x-y هواپیما 4.360، 1.610 و 0.276 میلی متر بود و طول محور اصلی در x-z صفحه برای مبدل های 32.3، 20.6 و 3.75 مگاهرتز به ترتیب 0.50، 2.25 و 15.00 میلی متر بود. 1b-d). اثرات غیر خطی با تخمین محتوای هارمونیک نسبی شکل موج در کانون ارزیابی شد. در مثال مبدل فوکوس 15 مگاهرتز در شکل. 1dسیگنالهای آزمایشی و شبیهسازیشده در نقطه کانونی مقایسه شدند و بهشدت همخوانی پیدا کردند (توسعه دادهها شکل XNUMX). 4a). علاوه بر این، دامنه هارمونیک دوم 19.8 دسی بل زیر پایه است (20.9 دسی بل در حالت شبیه سازی شده)، به این معنی که اگر انرژی بنیادی باشد E، هارمونیک دوم دارای انرژی است E/95 (داده های توسعه یافته شکل. 4b). بنابراین، ما می توانیم به طور منطقی از اثرات غیرخطی در محاسبات اثرات حرارتی غفلت کنیم، زیرا آنها 1٪ از انرژی درگیر را تشکیل می دهند. همین نتایج در 0.5 مگاهرتز و 15.0 مگاهرتز گرفته شد. تقریب های انتشار موج خطی به طور قابل توجهی هزینه محاسباتی شبیه سازی ها را کاهش داد. شبیهسازی انتشار خطی با جعبه ابزار Field II در MATLAB انجام شد52,53، در حالت تک رنگ، با همان خواص متوسط k-Wave (آب)، برای به دست آوردن میدان های حداکثر فشار سه بعدی. این میدان های فشار حداکثر برای ساخت یک اصطلاح منبع گرمایش استفاده شد (Q_{mathrm{US}} = frac{{alpha _{mathrm{np}}p_{mathrm{max}}^2}}{{rho _mathrm{b}c_mathrm{b}}})، که در آن αnp ضریب جذب مغز در فرکانس در نظر گرفته شده (59.04 Npm-1 در 15 مگاهرتز، محاسبه شده از αمغز = 0.21 دسی بل سانتی متر-1 مگاهرتز-y و y = 1.18)، جرم حجمی مغز ρمغز = 1,046 کیلوگرم متر-3، سرعت صدای مغز cمغز = 154 ثانیه-1 و pحداکثر میدان حداکثر فشار سه بعدی است. این عبارت منبع سپس در تفکیک معادله گرمای زیستی Penne استفاده شد (rho _{mathrm{brain}}C_{mathrm{brain}}timesfrac{{T جزئی}}{{t partial t}} = mathrm{div}left( {K_mathrm{t}timesnabla T} سمت راست) - rho _{ mathrm{blood}}C_{mathrm{blood}}P_{mathrm{blood}}چپ( {T – T_mathrm{a}} راست) + Q) در موج k، که در آن Cمغز ظرفیت گرمایی ویژه خون (3,630 J کیلوگرم) است-1 ° C-1), Kt هدایت حرارتی مغز (0.51 وات متر است-1 ° C-1), ρخون تراکم خون (1,050 کیلوگرم متر) است-3), Cخون ظرفیت گرمایی ویژه خون (3,617 J کیلوگرم) است-1 ° C-1), Pخون ضریب پرفیوژن خون (9.7 × 10-3 s-1), Ta دمای شریانی (37 درجه سانتیگراد) است، Q = QUS + ρمغزγمغز و γمغز تولید گرمای بافت مغز (11.37 وات کیلوگرم) است-1) (مرجع 54,55). شرایط اولیه برای دمای مغز تنظیم شد T0 = 37 درجه سانتی گراد
این شبیه سازی با بدترین سناریو در مورد افزایش دما مطابقت دارد. (1) انتشار آکوستیک فقط در آب شبیهسازی شده است (مقدار غیر کاهشیافته)، با ضریب تضعیف کمتر (2.2 × 10)-3 دسی بل سانتی متر مگاهرتز-2.00) از مغز (0.59 دسی بل سانتی متر مگاهرتز).-1.27) حتی اگر بخشی از انتشار در مغز رخ دهد. این pحداکثر بنابراین، نقشه ها بیش از حد برآورد می شوند. (2) جذب حرارتی فقط در بافت مغز شبیه سازی می شود، با ضریب جذب بالاتر (0.21 دسی بل سانتی متر مگاهرتز)-1.18) از آب، حتی اگر بخشی از میدان فشار حداکثر در داخل آب مخروط جفت صوتی واقع شده باشد. از این رو، QUS کمی بیش از حد برآورد شده است. ما دما را در سه بعد مکانی و زمانی ترسیم کردیم و نقطه حداکثر افزایش دما را جستوجو کردیم (دادههای توسعه یافته شکل XNUMX). 4c–f).
تحلیل آماری
تجزیه و تحلیل های آماری با نرم افزار Prism (Prism 9, GraphPad) انجام شد. مقادیر به صورت مقادیر میانگین ± خطای استاندارد میانگین (sem) در شکل ها و متن بیان و نشان داده می شوند، مگر اینکه طور دیگری مشخص شده باشد. داده ها در ولش بدون جفت تجزیه و تحلیل شدند t-تست (دو دنباله) یا یک مضرب جفت نشده t-تست با تصحیح Sidak-Bonferroni برای مقایسه های متعدد. تست های آماری در افسانه های شکل ارائه شده است.
خلاصه گزارش
اطلاعات بیشتر در مورد طراحی پژوهش در دسترس است خلاصه گزارش پورتفولیو طبیعت پیوند به این مقاله
- محتوای مبتنی بر SEO و توزیع روابط عمومی. امروز تقویت شوید.
- پلاتوبلاک چین. Web3 Metaverse Intelligence. دانش تقویت شده دسترسی به اینجا.
- منبع: https://www.nature.com/articles/s41565-023-01359-6
- :است
- ][پ
- $UP
- 000
- 1
- 10
- 100
- 11
- 1996
- 2%
- 2017
- 2018
- 2020
- 2021
- 28
- 39
- 3d
- 7
- 70
- 8
- 9
- a
- بالاتر
- دانشگاهی
- قابل دسترسی است
- مطابق
- حساب
- به دست آوردن
- کسب
- فعال سازی
- فعالیت
- واقعا
- پیشرفته
- پس از
- سن
- توافق
- AL
- چک
- معرفی
- اجازه می دهد تا
- تحلیل
- لنگر
- و
- حیوان
- حیوانات
- آنتی بادی
- اعمال می شود
- تایید کرد
- تقریبا
- هستند
- محدوده
- صف
- مقاله
- AS
- ارزیابی
- At
- اوت
- بطور خودکار
- در دسترس
- میانگین
- میانگین
- محور
- ستون فقرات
- مستقر
- اساس
- BE
- زیرا
- قبل از
- در زیر
- میان
- سیاه پوست
- خون
- بدن
- مغز
- شکستن
- بافر
- ساختن
- by
- محاسبه
- CAN
- ظرفیت
- اهميت دادن
- مورد
- سلول ها
- مرکزی
- مرکز
- اتاق
- کانال
- مشخصات
- چارلز
- تراشه
- برگزیده
- کلاس ها
- طبقه بندی
- کلیک
- کمیسیون
- مقایسه
- جامع
- محاسبه
- شرط
- انجام
- رسانایی
- متصل
- در نظر گرفته
- با توجه به
- محتوا
- کنترل
- کنترل
- کنترل کننده
- متناظر
- مطابقت دارد
- هزینه
- همراه
- پوشش داده شده
- سفارشی
- چرخه
- چرخه
- داده ها
- پایگاه داده
- روز
- روز
- مشخص
- تعریف کردن
- تحویل داده
- تحویل
- چگالی
- عمق
- طرح
- شناسایی شده
- کشف
- مشخص
- تعیین
- پروژه
- دستگاه
- DID
- مختلف
- دیجیتال
- رقمی شده
- ابعاد
- كشف كردن
- نمایش دادن
- فاصله
- توزیع
- تسلط
- کشیده شده
- راندن
- در طی
- e
- هر
- اثرات
- انرژی
- مهندسی
- افزایش
- خطا
- برآورد
- اتر (ETH)
- اصول اخلاق
- اروپایی
- پارلمان اروپا
- ارزیابی
- حتی
- مثال
- برانگیخته
- محروم
- تجربه
- صادرات
- بیان
- چشم
- چشم ها
- نما
- رشته
- زمینه
- انجیر
- شکل
- آمار و ارقام
- پر شده
- فیلتر
- تیر
- نام خانوادگی
- ثابت
- پرواز
- تمرکز
- متمرکز شده است
- پیروی
- برای
- فرم
- یافت
- چهارم
- FRAME
- فرکانس
- از جانب
- تابع
- تابعی
- اساسی
- بعلاوه
- ge
- GE بهداشت و درمان
- تولید
- نسل
- هندسه
- داده
- زمین
- گروه
- راهنمایی
- همیلتون
- سر
- سلامتی
- بهداشت و درمان
- بالاتر
- خیلی
- HTTPS
- انسان
- i
- شناسایی
- شناسایی
- IEEE
- تصاویر
- تصویربرداری
- مهم
- in
- جوجه کشی شده است
- فرد
- اطلاعات
- اول
- ورودی
- ابزار
- علاقه
- گرفتار
- ITS
- کلید
- لابراتوار
- بزرگتر
- بزرگترین
- تاخیر
- قانون
- لایه
- افسانه ها
- طول
- سطح
- لیس
- زندگی
- علوم زندگی
- سبک
- لاین
- ارتباط دادن
- مرتبط
- محلی
- به صورت محلی
- واقع شده
- محل
- مکان
- طولانی
- نگاه
- ساخته
- نگهداری
- عمده
- دستی
- نقشه
- نقشه ها
- توده
- ماده
- بیشترین
- MEA
- معنی
- اندازه گیری
- مکانیکی
- متوسط
- مرک
- روش
- موشها
- میکرون
- میکروسکپ
- حد اقل
- مخلوط
- ML
- حالت
- مدل
- MOL
- نظارت بر
- ماه
- ماه
- دهان
- متحرک
- MS
- چندگانه
- جهش
- ملی
- موسسه ملی بهداشت
- طبیعت
- شبکه
- شبکه
- نورون ها
- جدید
- بعد
- عدد
- هدف
- گرفتن
- به دست آمده
- of
- OLYMPUS
- on
- ONE
- افتتاح
- عملیاتی
- سفارش
- دیگر
- در غیر این صورت
- شبانه
- پارامترهای
- مجلس
- بخش
- گذشت
- اوج
- انجام
- عنقا
- فیزیکی
- قطعات
- پلاسما
- پلاستیک
- افلاطون
- هوش داده افلاطون
- PlatoData
- بازی
- پلاگین
- نقطه
- نقطه
- مقام
- موقعیت یابی شده
- موقعیت
- پتانسیل
- قدرت
- دقت
- ارائه شده
- فشار
- فشار
- روند
- تولید کردن
- ساخته
- برنامه
- املاک
- پروتکل
- پروتکل
- ارائه
- نبض
- تلمبه
- خرگوش
- مطرح شده
- موش صحرایی
- نرخ
- نسبت
- رسیدن به
- رسیده
- واقعی
- واقع بینانه
- بهبود
- منعکس شده
- با توجه
- رژیم
- منطقه
- مناطق
- ثبت
- جایگزین
- گزارش
- نمایندگی
- تحقیق
- آزمایشگاه های تحقیقاتی
- وضوح
- به ترتیب
- پاسخ
- پاسخ دادن
- پاسخ
- REST
- ترمیم
- بازگرداندن
- محدودیت
- نتیجه
- شبکیه چشم
- طلوع
- نقش
- اتاق
- مسیر
- s
- همان
- سناریو
- برنامه
- SCI
- علم
- علوم
- اسکریپت
- دوم
- ثانوی
- بخش
- انتخاب شد
- انتخابی
- حساسیت
- سنسور
- دنباله
- سرم
- جلسه
- جلسات
- تنظیم
- شکل
- سیگما
- سیگنال
- سیگنال
- سیلیکون
- مشابه
- شبیه سازی
- سایت
- شش
- اندازه
- پوست
- تکه
- کوچک
- نرم افزار
- راه حل
- صدا
- منبع
- فضایی
- خاص
- مشخص شده
- سرعت
- سنبله
- سنبله ها
- Spot
- گسترش
- پشته
- صحنه
- استاندارد
- آماری
- فولاد
- محرک
- مهاجرت تحصیلی
- موفقیت
- برتر
- سطح
- تعلیق
- سیستم های تعلیق
- روشن
- سیستم
- سیستم های
- مخزن
- هدف
- هدف گذاری
- کار
- فن آوری
- آزمون
- تست
- که
- La
- محوطه
- شان
- از این رو
- حرارتی
- اینها
- تامپسون
- هزاران نفر
- سه
- سه بعدی
- آستانه
- از طریق
- زمان
- بافت
- به
- جعبه ابزار
- آموزش دیده
- انتقال
- محاکمه
- آزمایش های
- حقیقت
- سونوگرافی
- us
- استفاده کنید
- کاربران
- v1
- تایید شده
- ارزش
- ارزشها
- دریچه
- VBA
- تایید
- تایید
- دید
- داخل بدن
- حجمی
- W
- آب
- موج
- اخر هفته
- هفته
- وزن
- خوب
- که
- سفید
- پنجره
- با
- در داخل
- جهان
- کتبی
- زفیرنت