গবেষকরা AFM ব্যবহার করে জীবন্ত কোষের সংকীর্ণ ক্যান্টিলিভার ফ্যাব্রিকেশন এবং উচ্চ-রেজোলিউশন ইমেজিংয়ের জন্য একটি প্রোটোকল সংজ্ঞায়িত করেন

গবেষকরা AFM ব্যবহার করে জীবন্ত কোষের সংকীর্ণ ক্যান্টিলিভার ফ্যাব্রিকেশন এবং উচ্চ-রেজোলিউশন ইমেজিংয়ের জন্য একটি প্রোটোকল সংজ্ঞায়িত করেন

উত্স নোড: 2863986
সেপ্টেম্বর 05, 2023 (নানোওয়ার্ক নিউজ) কানাজাওয়া বিশ্ববিদ্যালয়ের গবেষকরা রিপোর্ট করেছেন স্টার প্রোটোকল ("ন্যানোনিডেল প্রোবের সাথে পারমাণবিক বল মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে অন্তঃকোষীয় ন্যানোস্কেল কাঠামোর লাইভ ইমেজিংয়ের জন্য প্রোটোকল"জীবিত কোষের অভ্যন্তরে ন্যানোস্কেল কাঠামোর ছবি তোলার জন্য ন্যানোএন্ডোস্কোপি-এএফএম-এর পদ্ধতিগত বিবরণ এবং টিপস। জীবন্ত কোষের অভ্যন্তরে ন্যানোস্কেল কাঠামোর চিত্রগুলি সেলুলার কাঠামো এবং তারা প্রকাশ করতে পারে এমন কার্যকারিতার অন্তর্দৃষ্টির জন্য ক্রমবর্ধমান চাহিদা রয়েছে। এখন পর্যন্ত, এই ধরনের ছবি তোলার সরঞ্জামগুলি বিভিন্ন উপায়ে সীমিত ছিল, তবে কানাজাওয়া বিশ্ববিদ্যালয়ের তাকেশি ফুকুমা এবং তাকেহিকো ইচিকাওয়ার নেতৃত্বে গবেষকরা এখন ব্যবহারের জন্য একটি সম্পূর্ণ প্রোটোকল তৈরি করেছেন এবং রিপোর্ট করেছেন। পারমাণবিক শক্তি অনুবীক্ষণ যন্ত্র ব্যবহার (AFM) জীবন্ত কোষের অভ্যন্তরে চিত্রের জন্য। ন্যানোএন্ডোস্কোপি-এএফএম ব্যবহার করে জীবন্ত কোষে অ্যাক্টিন ফাইবার পর্যবেক্ষণের পদ্ধতির ওভারভিউ ন্যানোএন্ডোস্কোপি-এএফএম ব্যবহার করে জীবন্ত কোষে অ্যাক্টিন ফাইবার পর্যবেক্ষণের পদ্ধতির ওভারভিউ। (চিত্র: ইচিকাওয়া, এট আল।, স্টার প্রোটোকল) AFM প্রথম 1980-এর দশকে বিকশিত হয়েছিল এবং একটি নমুনা পৃষ্ঠ এবং একটি ক্যান্টিলিভারের সাথে সংযুক্ত একটি ন্যানোস্কেল টিপের মধ্যে শক্তির পরিবর্তনগুলিকে ব্যবহার করে পৃষ্ঠকে "অনুভূত" করতে এবং টপোগ্রাফির চিত্র তৈরি করতে ন্যানোস্কেল রেজোলিউশন। কৌশলটি নমুনা সম্পর্কে তথ্য আহরণের জন্য ক্রমবর্ধমান পরিশীলিত হয়েছে এবং ন্যানোস্কেলে গতিশীলতার চলমান চিত্রগুলি ক্যাপচার করার জন্য সরঞ্জামটির জন্য যথেষ্ট গতিতে। যাইহোক, এখনও পর্যন্ত, এটি পৃষ্ঠতলের মধ্যে সীমাবদ্ধ ছিল। অন্যান্য কৌশল বিদ্যমান যা একটি ঘরের ভিতরের একটি দৃশ্য প্রদান করতে পারে কিন্তু সীমাবদ্ধতা সহ। উদাহরণস্বরূপ, ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি রয়েছে, যা ন্যানোস্কেল এবং ছোট আকারে বিশদ সমাধান করতে সক্ষম, তবে প্রয়োজনীয় অপারেটিং অবস্থা জীবিত কোষের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ নয়। বিকল্পভাবে, জীবিত কোষগুলিতে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি নিয়মিত ব্যবহার করা হয়, তবে রেজোলিউশন বাড়ানোর জন্য ফ্লুরোসেন্স কৌশল বিদ্যমান থাকলেও, ন্যানোস্কেলে ফ্লুরোসেন্স ইমেজিংকে বাধা দেয় এমন ব্যবহারিক চ্যালেঞ্জ রয়েছে। AFM কোন সীমাবদ্ধতার মধ্যে ভুগছে না এবং কোষ ভেদ করার জন্য একটি ন্যানোনিডল দিয়ে টুলটিকে অলঙ্কৃত করে, ফুকুমা, ইচিকাওয়া এবং তাদের সহযোগীরা সম্প্রতি ন্যানোস্কেলে কোষের অভ্যন্তরে ছবি তোলার ক্ষমতা প্রদর্শন করেছে, যা তারা ন্যানোএন্ডোস্কোপি-এএফএম হিসাবে বর্ণনা করেছে। তাদের প্রোটোকলে, গবেষকরা ন্যানোএন্ডোস্কোপি-এএফএম-এর পদ্ধতিটিকে 4টি পর্যায়ে ভেঙে দেন। প্রথম কয়েকটি ধাপে কোষের প্রস্তুতি এবং একটি ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক দিয়ে দাগ দেওয়া এবং ফ্লুরোসেন্স পরীক্ষা করা, যা দ্রুত ইমেজিং এলাকা সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়। এরপরে ন্যানোনিডলগুলি নিজেরাই তৈরি করা, যার জন্য দুটি বিকল্প রয়েছে - হয় একটি ফোকাসড আয়ন রশ্মি দিয়ে একটি ন্যানোনিডল কাঠামোকে এচিং করা বা ইলেক্ট্রন রশ্মি জমা দিয়ে একটি তৈরি করা। তারপরে ন্যানোএন্ডোস্কোপি পর্যায়টি আসে এবং প্রতিবেদনে, গবেষকরা 2D এবং 3D ন্যানোএন্ডোস্কোপি উভয়ের জন্য পদ্ধতির বর্ণনা দেন। পরিমাপ করা ডেটা কল্পনা করার জন্য প্রয়োজনীয় ডেটা প্রক্রিয়াকরণের রূপরেখা দেওয়ার আগে ন্যানোএন্ডোস্কোপি চিত্রগুলি ক্যাপচার করার পরে পরিষ্কার করার সর্বোত্তম উপায় বর্ণনা করার জন্য এমনকি বিশদ বিবরণ রয়েছে। পদ্ধতিটি প্রতিটি পর্যায় সফলভাবে সম্পন্ন করার জন্য টিপস দিয়ে পরিপূর্ণ, সেইসাথে সমস্যা সমাধানের জন্য একটি নির্দেশিকা যখন জিনিসগুলি পুরোপুরি কাজ করছে না। এই কৌশলটি মাইটোকন্ড্রিয়া, ফোকাল আঠালো, এন্ডোপ্লাজমিক রেটিকুলাম, লাইসোসোম, গলগি যন্ত্রপাতি, অর্গানেল সংযোগ এবং তরল-তরল ফেজ-বিচ্ছিন্ন কাঠামো সহ অক্ষত অন্তঃকোষীয় কাঠামোর পর্যবেক্ষণের জন্য উপযুক্ত হওয়া উচিত। তারা উপসংহারে, "এই প্রোটোকলটি ন্যানোস্কেল কাঠামো অধ্যয়নের জন্য একটি আদর্শ সরঞ্জাম হয়ে উঠবে বলে আশা করা যেতে পারে।"

সময় স্ট্যাম্প:

থেকে আরো নানোওয়ার্ক